Cromatografia a colonna corta
2. Colonnacromatografica (tipo di rotazione)
3. Colonnacromatografica (manuale)
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Descrizione
Parametri tecnici
Rispetto alla cromatografia a colonna convenzionale,cromatografia a colonna cortaHa i vantaggi della velocità di separazione rapida, un'elevata efficienza di separazione e un funzionamento semplice. Tuttavia, ha anche alcune limitazioni, ad esempio per alcuni materiali speciali può essere difficile trovare una separazione fissa fissa e di fase mobile. Può essere adattato a diversi tipi di adsorbenti, come gel di silice, allumina, carbonio attivo, ecc. , nonché diversi tipi di fasi mobili, che lo rendono adatto per una vasta gamma di attività di separazione e purificazione. Adesso alla lunghezza corta della colonna, il volume di fase mobile richiesto è relativamente piccolo, riducendo così il solvente Consumo e generazione di rifiuti, in linea con il concetto di protezione ambientale e sviluppo sostenibile.
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Parametro
Passaggi per l'installazione della colonna
Colonna di carico a secco
Seleziona una colonna idonea, che di solito è realizzata in vetro o in plexiglass e ha una breve lunghezza per adattarsi alle esigenze della separazione rapida.
Preparare una quantità adeguata di fase stazionaria secca (come gel di silice, allumina, ecc.) Per garantire che la sua dimensione delle particelle sia uniforme per migliorare l'effetto di separazione.
Un imbuto viene posizionato nella parte superiore della colonna per versare uniformemente la fase stazionaria nella colonna.
La fase stazionaria secca viene versata lentamente e continuamente nella colonna attraverso un imbuto, mentre tocca delicatamente la parete laterale della colonna, in modo che la fase stazionaria possa essere riempita strettamente e uniformemente nella colonna.
Nel processo di riempimento, si dovrebbe prestare attenzione per evitare bolle, in modo da non influenzare l'effetto di separazione.
Quando la fase fissa viene caricata all'altezza richiesta, smettere di aggiungere e raschiare la superficie di fase fissa con un raschietto o uno strumento piatto per garantirne la planarità e l'uniformità.
Un dispositivo di ricezione (come una bottiglia conica) è attaccato alla parte inferiore della colonna per raccogliere l'eluente.
Prima di aggiungere la fase mobile, ricontrolla che la fase stazionaria sia confezionata strettamente e uniformemente e che non ci siano bolle nella colonna.
Colonna di carico a umido
Preparare i materiali:
Seleziona la colonna e la fase stazionarie appropriate.
Preparare la quantità appropriata di fase mobile (come il solvente organico) per la miscelazione con la fase stazionaria per formare omogenato.
Miscelazione di fase fissa e fase mobile:
Mescola la fase fissa con la giusta quantità di flusso e agita per formare una pasta uniforme.
Riempimento dell'omogenato:
L'omogenato misto viene versato lentamente e continuamente nella colonna, mentre si apre l'uscita nella parte inferiore della colonna per consentire alla fase mobile di fluire e guidare la fase fissa per stabilirsi gradualmente nella colonna.
Durante il processo di caricamento, dovrebbe anche essere prestata attenzione per evitare bolle e toccare delicatamente la parete laterale della colonna per promuovere l'insediamento uniforme della fase stazionaria.
Superficie di fase stazionaria piatta:
Quando la fase stazionaria si deposita all'altezza desiderata, smetti di aggiungere l'omogenato e attendi che la fase mobile si scarichi completamente.
Leviga la superficie di fase stazionaria con un raschietto o uno strumento piatto per garantire la sua planarità e uniformità.
Preparare il dispositivo di ricezione:
Un dispositivo di ricezione è collegato alla parte inferiore della colonna per la successiva raccolta di eluenti.
Controlla e regola:
Prima di aggiungere il campione, ricontrolla che la fase stazionaria sia confezionata strettamente e uniformemente e che non ci siano bolle nella colonna.
Se necessario, è possibile aggiungere una quantità adeguata di fase mobile per il lavaggio per rimuovere ulteriormente le bolle e bilanciare la colonna.
Che si tratti di un carico secco o a umido, è necessario prestare attenzione alla normalizzazione e all'accuratezza dell'operazione per garantire l'effetto di separazione e la stabilità della colonna cromatografica. Allo stesso tempo, durante il processo di caricamento della colonna, dovremmo prestare molta attenzione al riempimento della fase fissa e alla situazione della bolla nella colonna e adeguarla e affrontarla in tempo.
Guida per la pulizia
La pulizia dell'attrezzatura è un collegamento chiave relativo all'efficienza di separazione, alla durata delle colonne e alla precisione dell'analisi. La seguente è uno sguardo approfondito ai problemi di pulizia con cromatografia a colonna corta, progettata per fornire una serie completa di linee guida per la pulizia.
L'importanza della pulizia
Il metodo dello spettro è ampiamente utilizzato in analisi chimica, sintesi dei farmaci, monitoraggio ambientale e altri campi. Tuttavia, nel processo di utilizzo, il pilastro sarà influenzato da vari residui e inquinanti, con conseguente ridotta efficienza di separazione, picco di sterili, blocco del pilastro e altri problemi. Pertanto, la pulizia regolare è una misura importante per garantire l'effetto di separazione, estendere la durata della colonna e migliorare l'accuratezza dell'analisi.
Preparazione prima della pulizia
Scopri i materiali e le caratteristiche delle colonne
Diversi materiali della colonna (come gel di silice, allumina, polimero, ecc.) Hanno una stabilità chimica diversa e resistenza al solvente. Pertanto, è necessario comprendere il materiale e le caratteristiche della colonna prima della pulizia per scegliere il solvente e il metodo di pulizia appropriati.
Prepara il solvente per la pulizia
La scelta del solvente per la pulizia dovrebbe essere basata sulla natura del campione, sul tipo di residui e sul materiale della colonna. I solventi di pulizia comunemente usati includono metanolo, etanolo, acetone, diclorometano, esano, ecc. Questi solventi dovrebbero avere una buona solubilità e volatilità per rimuovere efficacemente i residui e volatilizzare rapidamente.
Preparare il dispositivo di pulizia
Il dispositivo di pulizia di solito include una pompa cromatografica, un tubo di collegamento, una bottiglia di raccolta liquida di scarto, ecc. Assicurarsi che l'unità di pulizia sia pulita e priva di perdite e prepara i connettori e le guarnizioni necessarie.
Passi di pulizia
Rimuovere la colonna
Prima di pulire, rimuovere la colonna dal cromatografo. Presta attenzione per evitare di tirare fortemente durante il funzionamento, in modo da non danneggiare l'interfaccia o causare la piega della colonna.
Rimuovere le parti contaminate
Utilizzare uno strumento di taglio per rimuovere una sezione contaminata dall'estremità anteriore della colonna (cioè l'estremità vicino al campionatore). La lunghezza di rimozione è generalmente determinata dal grado di contaminazione e dalla lunghezza della colonna ed è generalmente consigliabile rimuovere circa 0. 5 m. Lo scopo di questo passaggio è rimuovere sezioni potenzialmente contaminate dello stigma e garantire l'efficacia del successivo processo di pulizia.
Collegare il dispositivo di pulizia
Collegare la colonna all'unità di pulizia per garantire una connessione stretta senza perdite. Presta attenzione alla direzione della colonna quando si collega per garantire che il solvente per la pulizia possa passare senza intoppi attraverso la colonna.
Scegli la pulizia del solvente e la portata
Seleziona il solvente di pulizia appropriato in base al materiale della colonna e alla natura del residuo. Il solvente viene pompato nella colonna a una portata appropriata usando una pompa cromatografica prima dell'iniezione di solvente. La scelta della portata dovrebbe essere basata sulle specifiche della colonna e sulla viscosità del solvente di pulizia, ed è generalmente raccomandato di controllare entro l'80% della portata massima della colonna.
Colonna a filo
Accendere la pompa cromatografica e scaricare il solvente di pulizia attraverso la colonna a una portata costante. Il tempo di lavaggio dovrebbe essere basato sul grado di contaminazione della colonna e sull'effetto del solvente di pulizia, ed è generalmente raccomandato di scaricare fino a quando l'effluente è chiaro e trasparente. Durante il processo di lavaggio, il solvente per la pulizia può essere sostituito in tempo per migliorare l'effetto di pulizia.
Controlla l'effetto di pulizia
Al termine della pulizia, la colonna viene reinstallata sul cromatografo e vengono eseguiti i test di prestazioni necessari. Confrontando il cromatogramma prima e dopo la pulizia, è possibile valutare se l'effetto di pulizia è soddisfacente. Se ci sono ancora residui o scarse prestazioni, il processo di pulizia può essere ripetuto o una nuova colonna può essere sostituita.
Precauzioni di pulizia
Evita di usare solventi ad alto punto di ebollizione:
Il solvente ad alto punto di ebollizione è difficile da volatilizzare nella colonna cromatografica e facile da rimanere nella colonna, influenzando l'analisi successiva. Pertanto, nel processo di pulizia dovrebbe cercare di evitare l'uso di solventi ad alto punto di ebollizione.
Nota la miscibilità del solvente:
Quando si sostituisce il solvente per la pulizia, assicurarsi che il solvente utilizzato in seguito sia miscibile con il solvente precedente per evitare precipitazioni o delaminazione.
Controllo a filo pressione:
Durante il processo di lavaggio, la pressione di lavaggio deve essere controllata all'interno dell'intervallo di tolleranza della colonna per evitare danni alla colonna.
Cambia regolarmente cuscinetti e guarnizioni campione:
I cuscinetti e le guarnizioni di campionamento sono le parti dei cromatografi che sono soggetti a invecchiamento e danni. La sostituzione regolare di questi componenti può evitare perdite e contaminazione e garantire l'accuratezza dell'analisi cromatografica.
Registra il processo di pulizia:
Dopo ogni pulizia, il processo di pulizia, il solvente utilizzato, il tempo di lavaggio e altre informazioni dovrebbero essere registrati per le successive analisi e tracciabilità.
Riepilogo
Il problema di pulizia della cromatografia a colonna corta è un collegamento importante relativo all'efficienza di separazione, alla vita della colonna e alla precisione dell'analisi. Scegliendo il giusto solvente per la pulizia, controllando la pressione di lavaggio e la portata, prestando attenzione alla miscelabilità del solvente e cambiando regolarmente il cuscinetto e la guarnizione del campione, il residuo nella colonna può essere effettivamente rimosso e la sua durata di servizio può essere estesa. Allo stesso tempo, documentare il processo di pulizia è anche un passo importante per garantire l'accuratezza e la tracciabilità analitiche.
Nel funzionamento effettivo, il metodo di pulizia e il solvente appropriati devono essere selezionati in base al materiale della colonna, al grado di inquinamento e ai requisiti sperimentali. Per diversi tipi di residui e contaminanti possono essere necessarie diverse strategie di pulizia e combinazioni di solventi. Pertanto, durante la pulizia della cromatografia a colonna corta, si consiglia di fare riferimento al manuale e alla guida operativa delle istruzioni della colonna e si regola in modo flessibile in base alla situazione reale.
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